本试剂盒仅限于科学研究,禁止用于医学诊断。以下是人神经细胞粘附分子配体1 (NCAM-L1) Elisa试剂盒的使用说明。
试剂盒检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化作用下转化为蓝色,随后在酸性环境中变为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样本浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. **血清**:使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。收集血液后,以3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. **血浆**:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. **细胞上清液**:以3000转/分钟离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. **组织匀浆**:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. **保存**:若样本未能及时检测,应按一次用量分装并存放于-20℃,避免反复冻融。解冻时请在室温下进行,并确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
本试剂盒的标准品浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
结果判断
在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,生成标准品线性回归曲线,依据曲线方程计算各样本的浓度。
免责声明
本试剂盒的使用者需明确以上信息,并遵循适用的实验室安全标准。
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