88858cc永利官网的本试剂盒专为科学研究设计,不得用于医学诊断。以下为人白介素1(IL-1) ELISA试剂盒的使用说明。
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入已预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中。经过适当的温育后,彻底洗涤微孔。然后使用TMB底物进行显色反应,TMB在过氧化物酶的作用下转变为蓝色,并在酸性条件下转变为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,可使用酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),进而计算样品的浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原及内毒素的试管,避免在操作中刺激细胞。血液收集后,3000转离心10分钟,以迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理。3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,随后进行3000转离心10分钟以取上清。
5. 保存:若样品未能及时检测,应按单次用量分装并冷冻保存于-20℃,尽量避免反复冻融。在室温下解冻前需确保样品均匀充分地解冻。
操作注意事项
88858cc永利官网的试剂盒包含标准品(S0-S5),其浓度依次为0、25、50、100、200、400 pg/mL。
在进行20×洗涤缓冲液的准备时,需将蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水进行配置。
结果判断
在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,进而绘制标准品的线性回归曲线,使用该曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:使用本试剂盒前应仔细阅读说明书。