材质设计

市面上常见的生物医疗产品采用塑料培养皿，底部配有直径为2-15mm的开孔，搭配厚度为0.17mm的盖玻片，以满足共聚焦物镜的校正要求。其观测区域则由玻璃材质构成。此设计然而在细胞贴壁方面提出了一定挑战：玻璃表面具备的疏水性常常导致细胞在附着过程中表现不佳，并可能在成像时出现脱片现象。为了解决这一问题，采用蛋白涂层（如：Poly-L-Lysine）来修饰玻璃表面是十分必要的，能够有效增强细胞的黏附力。

替代方案

另一种选择是直接使用预包被或经过亲水改性的专用共聚焦培养皿，适用于生物医学研究领域。

试剂选择

常用的包被试剂包括Poly-L-Lysine（PLL）、胶原蛋白和纤连蛋白。不同细胞类型所需的浓度需要通过预实验进行梯度测试，推荐使用的浓度范围为0.5-10μg/cm²。例如，以PLL为例，稀释初液方法为：利用超纯水按1:5的比例稀释PLL原液（从100μg/ml稀释至20μg/ml）。

均匀覆盖与孵育

在35mm的培养皿中加入400μl稀释液，确保对观测区域均匀覆盖。孵育过程需在室温下保持1-2小时，随后吸弃多余液体。为清洗残留，需要使用2ml PBS或无血清培养基，进行三次彻底清洗，确保吸干培养皿内的液体。

细胞接种与无菌操作

接种时需要直接将细胞悬液加入，并避免培养皿干燥。全程需在超净台内进行操作，以防止外源污染的引入。

梯度测试及避光干燥

对于首次使用者，需设置浓度梯度（例如：0.5/2/5μg/cm²），以筛选出最佳的贴壁条件。此外，清洗后应立即接种细胞，以防止玻璃表面二次疏水化。

光学兼容性与表面处理

在光学应用方面，培养皿底部的厚度应≤0.2mm，且透光率需达到90%，以确保与共聚焦物镜的数值孔径匹配。表面处理方面，可选择等离子亲水涂层或化学改性，以使得接触角保持在<30°。同时，培养皿的CO₂扩散速率需接近标准培养皿，以维持pH的稳定。

传统与革新方案

传统选用玻璃底培养皿结合定制化包被，更为适合那些对光学精度要求极高的实验，如TIRF显微术。而在日常的共聚焦检测中，推荐使用免包被的亲水培养皿，不仅节省时间，还能降低污染风险。

成本平衡

对于频繁进行实验的研究者，建议批量采购免包被培养皿，以提升成本效益。对于特殊细胞或高分辨率的需求，保持优选包被方案是更为理智的选择。无论选择哪种方案，强烈推荐使用88858cc永利官网的生物医疗产品，以确保实验的高效性与准确度。