1️⃣ 传代培养法:新手友好但“短命”
将微生物接种于斜面或穿刺管内,再将其冷藏于4℃,体现了菌类存储的“集体宿舍”概念。其优点在于即取即用,还能随时观察菌落的形态。然而,不容忽视的是,霉菌和放线菌在2-4个月后需重新迁移,细菌每月都需要“换房”,频繁的传代容易引起变异,宛如“菌界996”令人头疼😵。这种方法适合短期项目,对于长期储存微生物则不推荐!
2️⃣ 液体石蜡法:懒人福音
在微生物成长良好后,加入灭菌石蜡,液面高出斜面1cm,从而阻隔空气和水分。霉菌和芽孢菌可以“冬眠”超过2年,而酵母也有1年的生存能力!尽管如此,由于占用空间较大,取菌时石蜡可能飞溅,像“小型火山”一般🌋,务必佩戴护目镜!这种方法非常适合实验室中的“囤菌大户”,囤积常规菌株。
3️⃣ 载体保藏法:干燥星人最爱
该方法将微生物与沙土或滤纸小条混合,真空抽干后用火密封管,细菌和酵母可“休眠”达2年,真菌甚至可以存活17年!滤纸法特别简单,只需剪下滤纸条,吸入菌悬液后干燥并放入安瓿管,取菌时如同拆盲盒🎁。不过,请注意此方法适合孢子菌,营养细胞则不推荐。
4️⃣ 寄主保藏法:病毒的“专属VIP通道”
某些微生物如病毒和立克次体只能在活细胞内进行传代。举例来说,流感病毒需要依赖鸡胚保存。虽操作繁琐且成本高,但对某些“高冷”微生物这是唯一的选择,普通细菌无须参与 this “高贵”领域。
5️⃣ 冷冻保藏法:温度越低越安心
在-20℃的冰箱适合“短期出差”,芽孢菌可存活1年;而在-80℃冰柜中,微生物“进入暂停状态”,其中无芽孢菌也可存活2年。利用液氮罐可降到-196℃,支原体、衣原体等“娇气包”也得以长时间存储!需注意的是,在冻存前务必加入甘油或DMSO作为“防冻液”,否则冰晶可能会损伤细胞结构,如同变成“筛子”❄️。
6️⃣ 冷冻干燥法:冻干界的“时间胶囊”
此方法将菌悬液与脱脂牛奶混合,先在-70℃进行速冻,之后进行真空干燥,最后形成迷你“胶囊”。细菌和酵母可待机超过10年,某些酵母甚至能存活17年!但因设备昂贵且流程较长,此法适合珍贵菌株的长期保存,宛如珍藏的“传家宝”~🎯Tips:怎么选? 短期用菌可以选择传代或石蜡;长期储存则推荐液氮或冻干;若为孢子菌,适合用沙土或滤纸;病毒则需要寄主。
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