前言：类器官已在生命科学和医学研究中崭露头角，成为研究疾病机制、药物筛选和精准医疗等领域的“明星模型”。然而，科研人员在尝试类器官培养时，常常遇到“无法形成结构”、“细胞活性低”、“传代失败”等难题。根本原因在于培养体系中的细胞因子选择和配比可能决定成败！接下来，我们将结合经典的类器官培养方案WENR（Wnt3a、EGF、Noggin、R-Spondins），解析“四大护法”如何发挥作用，帮助您解决类器官培养的难题！

WENR：类器官培养的经典方案

WENR（或称为WNER）由荷兰Hubrecht研究所的Hans Clevers团队开发，核心成分包括Wnt-3a、EGF、Noggin和R-Spondins，通常被称为类器官培养的“四大护法”。该方案经过不断演化，与其他细胞因子或小分子抑制剂相结合，形成适用于多种类器官的培养条件。目前，WENR方案已广泛应用于胃、小肠、结肠、胰腺和肝脏等多种类器官的培养中。【88858cc永利官网】在此领域提供高品质的细胞因子，助力科研工作者实现更好的实验效果。

WENR“四大护法”解析

1. Wnt-3a：干细胞增殖的“发动机”

Wnt-3a被认为是经典Wnt通路的激活剂，能够通过稳定β-catenin蛋白，启动下游靶基因（如c-Myc、Cyclin D1），参与细胞的发育、增殖和分化。研究表明，无论来源如何，类器官在增殖、干性维持及分化过程中均依赖于Wnt信号通路。小鼠结肠类器官的建立中，引入外源性Wnt-3a对增殖至关重要。若不添加Wnt-3a，类器官在超过3天后将无法存活。

2. EGF：细胞增殖的“加速器”

表皮生长因子（EGF）结合受体后，激活MAPK/ERK通路，促进细胞的增殖与存活。EGF不仅刺激上皮细胞的增殖和血管生成，还促进类器官三维结构的形成。尽管EGF不是类器官形成的必需因子，但其能够显著提升类器官的体积。优化的WENR方案在胃肠道类器官构建中得到了广泛应用。

3. Noggin：抑制分化的“守门员”

Noggin作为一种内源性抑制剂，通过阻断BMP与受体结合，促进干细胞增殖，为类器官的形成提供足够的细胞。它还通过抑制BMP信号通路，维持干细胞的干性，影响细胞命运的决定和分化过程。在类器官培养中，Noggin通常与Wnt-3a和R-Spondins一起使用，以平衡BMP和Wnt信号通路，从而促进类器官的生长和分化。

4. R-Spondins：Wnt信号的“放大器”

R-spondin通过增强Wnt信号的表达来促进干细胞增殖与类器官结构的形成。研究显示，缺乏R-spondin的类器官在几天后停止生长，而适量的R-spondin能够显著提升类器官的生长速度，避免结构损坏。不同浓度的R-spondin对类器官的生长状态造成显著影响，因此需要根据具体情况调整使用。

WENR方案实践中的注意要点

在实际操作中，需严格控制Wnt-3a的浓度，以避免其过度激活导致类器官结构紊乱。R-spondin应与Wnt-3a协同使用，建议依据类器官类型优化Wnt-3a浓度，通常为50-100 ng/mL。EGF则需使用无血清培养基，避免被蛋白酶降解，建议每隔一段时间更换培养基。对于Noggin的使用，缺失会导致类器官早期分化，而与Wnt-3a的组合被认为是长期培养的重要因素。

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