肝癌是全球癌症死亡的第三大原因，在我国的发病率与致死率一直居高不下。随着类器官技术的发展，攻克肝癌这一难题迎来了新的契机。利用干细胞来源的人肝癌类器官培养通常分为多个阶段，每个阶段需用到不同的细胞因子，以助于细胞的增殖、分化与维持。

一、诱导分化阶段细胞因子

在此阶段，我们主要使用以下几种细胞因子：

• Activin A：激活SMAD2/3信号，诱导内胚层分化。
• BMP4：促进内胚层细胞的形成。
• FGF2（bFGF）：推动内胚层向肝前体细胞分化。
• Wnt3a：激活Wnt/β-catenin通路（在肝癌中常常异常激活），维持干细胞特性并诱导早期肝祖细胞增殖。

二、前体细胞扩增阶段细胞因子

在前体细胞扩增阶段，使用以下细胞因子可促进细胞生长：

• EGF（表皮生长因子）：促进上皮细胞的增殖。
• HGF（肝细胞生长因子）：通过c-Met受体激活促增殖和抗凋亡信号。
• FGF10：维持肝祖细胞的自我更新能力。
• R-spondin1：增强Wnt信号，保持细胞增殖（模拟肝癌中Wnt通路的异常情况）。

三、成熟与肿瘤化阶段细胞因子

在成熟与肿瘤化阶段，以下细胞因子扮演着重要角色：

• Oncostatin M（OSM）：与地塞米松联合使用可促进肝细胞的成熟。
• TGF-β：诱导上皮-间质转化（EMT），增强肿瘤的侵袭性（某些肝癌亚型依赖此机制）。

四、继续培养阶段细胞因子

在继续培养阶段，可以结合以下细胞因子来维持细胞活性：

• EGF + HGF：持续促进细胞增殖。
• Wnt3a + R-spondin1：维持Wnt通路的激活（模拟CTNNB1突变型肝癌）。

通过分阶段的细胞因子调控，可以建立高度模拟肝癌生物学特性的类器官模型，这对于药物筛选和机制研究具有重要价值。在实际操作中，建议根据具体的研究目标优化培养条件。

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