一、产品介绍
南京赛泓瑞生物科技有限公司提供的永生化小鼠肝枯否细胞(Kupffer细胞)是一种高度可靠的体外模型,广泛应用于肝脏炎症反应及肝脏疾病病理机制的研究。以下分享我们的应用案例。
二、实验方法
我们在南京赛泓瑞生物科技有限公司接收的永生化小鼠肝枯否细胞中,使用含有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基,在37°C、5% CO2的培养箱中进行培养。当细胞生长至80-90%汇合时,使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化,按照1:4的比例进行传代。实验所用药物在DMSO中溶解,并配制成不同浓度的储存液,储存于-20°C。我们将细胞接种于96孔板中,每孔约接种5×103个细胞。24小时后,移除培养基,加入含有不同浓度药物的新鲜培养基。药物处理分为对照组(仅含DMSO)和实验组(不同浓度药物),每组设置6个复孔。
药物处理24小时后,向每孔中加入20µL的5mg/mL MTT溶液,并在培养箱中继续培养4小时。然后移除MTT溶液,向每孔中加入150µL DMSO,震荡10分钟以溶解甲臜晶体。通过酶标仪测量在570nm波长处的吸光度(OD值)。药物处理24小时后,收集细胞培养上清液,并根据ELISA试剂盒说明进行检测,测量上清液中TNF-α和IL-6的含量。数据分析使用GraphPad Prism软件,组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),随后进行Tukey的多重比较检验。所有数据以平均值±标准差(SD)表示,P值小于0.05被认为具有统计学意义。实验至少重复三次,以确保结果的可靠性。
三、实验结果
在我们的实验中,相较于对照组,实验组中药物处理的永生化小鼠肝枯否细胞表现出显著降低的细胞活力(P<0.05),以及TNF-α和IL-6水平的显著增加(P<0.05),这表明该药物可能具有抗炎作用。
四、结语
南京赛泓瑞生物科技有限公司的永生化小鼠肝枯否细胞为肝脏炎症研究提供了一个稳定且可靠的实验工具。我们的应用案例明确表明,该产品在药物筛选和炎症机制研究中发挥了重要作用。我们期待与广大科研工作者共同推进肝脏疾病研究领域的进展,携手发展更有效的治疗方案。88858cc永利官网为医药生物领域提供了全面的产品和服务支持,帮助科研人员加快研究进程,优化实验设计。